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si-NC和si-KIF1C
热图tHeatmap差异基因表达
生成一个热图(heatmap),用于可视化基因在不同细胞群(clusters)中的表达模式。
热图将展示:
每个基因在不同细胞群中的表达水平。
细胞按聚类分组,顶部可能有颜色条表示聚类信息。
基因按表达模式排序,便于观察标记基因。
行(Rows):
每一行代表一个基因(来自 top5_markers$gene)。
基因的顺序通常是按聚类或表达模式排序的。
列(Columns):
每一列代表一个细胞(或细胞群,取决于 Seurat 对象的设置)。
默认情况下,细胞会按聚类(cluster)分组。
颜色:
颜色表示基因的表达水平:
红色:高表达。
蓝色:低表达。
白色:中等表达。
DotPlot-差异基因注释
这段代码将生成一个点图,其中
x 轴代表聚类。
y 轴代表前 5 个标记基因。
点的大小与表达该基因的细胞百分比相对应。
颜色强度对应基因的平均表达水平。
DotsPlot可视化marker基因
点图的构成
x 轴:
通常表示不同的细胞群(clusters)或样本(samples)。
每个柱子代表一个细胞群。
y 轴:
表示基因名称。
每个点代表一个基因在一个细胞群中的表达情况。
点的大小:
表示基因在某个细胞群中表达的细胞比例(表达频率)。
点越大,表示该基因在该细胞群中表达的细胞比例越高。
点的颜色:
表示基因在某个细胞群中的平均表达量。
颜色越深(通常为红色),表示平均表达量越高;颜色越浅(通常为蓝色),表示平均表达量越低。
表达频率(点的大小):
点的大小反映了基因在某个细胞群中表达的细胞比例。
例如,如果一个基因在某个细胞群中的点很大,说明该基因在该细胞群中广泛表达。
平均表达量(点的颜色):
点的颜色反映了基因在某个细胞群中的平均表达水平。
例如,如果一个基因在某个细胞群中的点颜色很深(红色),说明该基因在该细胞群中高表达。
细胞群特异性:
如果一个基因在某个细胞群中的点既大又深,说明该基因在该细胞群中特异性高表达。
例如,CD3D 和 CD3E 在 T 细胞群中的点通常既大又深,表明它们是 T 细胞的特异性标记基因。
跨细胞群的比较:
通过比较不同细胞群中点的大小和颜色,可以了解基因在不同细胞群中的表达模式。
例如,MZB1 和 IGHG1 在浆细胞群中通常高表达,而在其他细胞群中表达较低。
VlnPlot可视化marker基因
小提琴图的构成
x 轴:
通常表示不同的细胞群(clusters)或样本(samples)。
每个小提琴代表一个细胞群。
y 轴:
表示基因的表达量(通常是 log 归一化后的表达量)。
小提琴的形状:
小提琴的宽度表示基因表达量的分布密度。
宽度越宽,表示该表达量范围内的细胞越多。
内部图形:
通常在小提琴内部会叠加一个箱线图(Box Plot),用于展示中位数、四分位数等统计信息。
如何解读小提琴图
表达水平:
小提琴的高度反映了基因在某个细胞群中的表达水平。
例如,如果一个基因在某个细胞群中的小提琴很高,说明该基因在该细胞群中高表达。
表达分布:
小提琴的宽度反映了基因表达量的分布情况。
例如,如果一个基因在某个细胞群中的小提琴很宽,说明该基因的表达量在该细胞群中分布较广。
细胞群特异性:
如果一个基因在某个细胞群中的小提琴既高又宽,说明该基因在该细胞群中特异性高表达。
例如,CD3D 和 CD3E 在 T 细胞群中的小提琴通常既高又宽,表明它们是 T 细胞的特异性标记基因。
跨细胞群的比较:
通过比较不同细胞群中小提琴的高度和宽度,可以了解基因在不同细胞群中的表达模式。
例如,MZB1 和 IGHG1 在浆细胞群中通常高表达,而在其他细胞群中表达较低。
可视化(UMAP)
更好地平衡局部和全局结构,能够同时展示细胞簇的细节和整体分布。
簇之间的相对位置更接近真实关系。
对超参数的敏感性较低,结果更稳定。
可视化(TSNE)
强调局部结构,能够清晰地展示细胞簇的细节。
可能导致簇之间的分离过于明显,难以反映全局关系。
对超参数(如困惑度)敏感,不同参数可能导致不同的可视化结果。
PCA线性降维
热图
识别高变基因(筛选基因)
通过识别高变基因,可以帮助揭示细胞群体中的潜在异质性和功能差异,为后续的差异表达分析和细胞类型鉴定提供重要参考。